HPLC测定没食子中没食子酸的含量

摘要：目的建立没食子中没食子酸的含量测定方法。方法采用液相色谱法测定没食子酸的含量，色谱柱为Waters Symme @Cl8柱（5μm，4．6 mm×150mm）；流动相为甲醇一0．05％磷酸溶液（5：95）；流速0．8 ml·min ；检测波长273 Bill。结果没食子酸进样量在0．0506～0．4060μg范围内线性关系良好，平均加样回收率为98．99％，RSD：1．5％。结论所用方法简便、快速、准确。
关键词：没食子；没食子酸；HPLC
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1006—0103（2005）01—0071—02
Determination of gallic acid in Turkish gaUs by HPLC
REN Yuan，DU Nian—sheng（Pharmacy College ofXinjiang Medical University，Urmnqi 830054，Ch／na）

Abstract：OBJECTIVE To establish a determination method of gallic acid in Turkish galls．METHODS An HPLC method was used .The column was packed with Waters Symmetry@Ci8（5μm，4．6mm×150 mm）．The phase was methanol一0． 05％ ph0sphoric acid（5：95）．The flow rate was 0．8 ml/min．The detective wavelength was at 273 nln．RESULTS The calibration curves were linear within 0．O506—0．4O6Oμg．Th e recovery Was 98．99％ with兄 of 1．5％ ．CONCLUSION Th is method is simple，rapid and accurate．
Key words：Turkish Galls；Gallic acid；HPLC

    没食子是由没食子蜂的幼虫寄生于没食子树幼枝上所产成的虫瘿。没食子中含有鞣质和没食子酸，为维吾尔医生常用药，具有收敛、抗炎、促进黏膜愈合的作用。现参照文献|J 采用HPLC测定没食子中没食子酸的含量。
1 实验部分
1．1 仪器与试药：液相色谱仪包括Waters Delta 6OO泵，waters 2996 PDA检测器（美国Waters公司）。没食子药材（新疆维吾尔自治区药品检验所鉴定）；没食子酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0831—9501）；甲醇（色谱纯）；磷酸（分析纯）；水为重蒸水。
1．2 色谱条件
    色谱柱为Waters SymmetryCl8（5μm，4．6mm×150 mm）；流动相为甲醇一0．05％磷酸溶液（5：95）；检测波长273nm；流速0．8 ml/min ；柱温25℃。
1．3 方法与结果
1．3．1 溶液的制备：精密称取没食子粗粉1 g，置50 m1量瓶中，加甲醇30 m1，超声提取1 h，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液l m1，甲醇定容至l0 m1量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。精密称取干燥至恒重的没食子酸对照品2．55mg，置50 m1量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得对照品溶液。
1．3．2 线性范围的考察：精密吸取没食子酸对照品溶液1．0、2．0、4．0、6．0、8．0 ml于5个l0 m1量瓶中，分别加甲醇至刻度，摇匀，各吸取l0 l注入液相色谱仪，以进样量（ g）为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，回归，得线性方程为：A=1．468×lO6C-1． 739×lO4（r=0．9997）。结果表明，没食子酸在0．0506 0．4O60／_tg范围内，具有良好的线性关系。
1．3．3 精密度试验：在“1．2．1”项条件下，精密吸取没食子酸对照品溶液10μl，连续进样6次，峰面积的RSD=1．3％ ，表明仪器精密度良好。
1．3．4 稳定性实验：取室温下放置的样品溶液，在20 h内进样6次，其峰面积的RSD=2．4％，表明样品溶液在室温下20 h稳定。
1．3．5 方法精密度（重复性）试验：精密称取没食子药材1 g，按“1．3．1”项下方法制备6份供试品溶液，分别测定没食子酸的含量，RSD=3．8％，证明此方法精密度良好。
1．3．6 加样回收率试验：精密称取已知含量的没食子样品细粉，分别加入没食子酸对照品，按“1． 3．8”项下方法测定没食子酸的含量，再计算回收率，结果见表1。
1．3．7 样品的测定：精密称取没食子药材1 g，按“1． 3．1”项下方法制备供试品溶液，经微孔滤膜（0．45μm）过滤，取续滤液l0 l进样，同时进l0μl对照品溶液，进样5次，用峰面积按外标法计算，得没食子酸的平均含量31．65 mg/g，RSD=0．98％（n=5）。

2 讨论
    没食子中主要含有可水解的鞣质，加热提取会水解成没食子酸，因此，样品选用超声提取的方法。曾分别超声0．5、1．0、1．5、2．0 h，结果显示，1．0 h已经提取*。文中方法用于没食子中没食子酸的含量测定，操作简便，结果准确。

参考文献：
【1】 刘起中，张可可．HPLC法测定五倍子中没食子酸的含量[J]中草药，2002，33（5）：427